免疫亲和柱净化_液相色谱_串联质谱法测定海洋生物中河豚毒素_严忠雍

宋丹杨 | -> | 565| 0| 0.174286MB |兔疫亲和柱;液相色谱州卜联质谱;海洋生物;河豚毒素

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    河豚毒素(Tetrodotoxin } TTX)是一种天然海洋生物神经毒素,分布广泛,主要存在于河豚鱼中,圆尾
宣、蓝环章鱼、螺类等其它海洋生物中也有存在。河豚毒素毒性极强,食用0. 5 mg就可致人死亡,其带
正电荷的肌基能伸入钠通道的离子选择过滤器,和通道内壁上的游离梭基结合,阻碍Na+进入,从而抑
制神经冲动的传导,使人感觉神经麻痹,四肢瘫痪,呼吸困难,最后因呼吸抑制而死亡[D -al。我国每年都
有因食带有TTX的海洋生物而导致中毒的事件发生。鉴于河豚毒素的严重危害,有必要建立一种简
便、快速有效检测河豚毒素的方法。目前,河豚毒素的检测方法有生物测定法[[5]、高效液相色谱法
(HPLC ) }6''}、液相色谱串联质谱法(LC}VIS) }8}"」及酶联免疫法(ELISA) }'z}等。其中,生物测定法一般
需要专门动物,适用性差,且操作繁琐,费时费力重复性差;酶联免疫法虽特异性强,但酶联免疫反应耗
时长,操作难度较大;液相色谱串联质谱法灵敏度高,但现有的文献方法检出限偏高,前处理复杂,且采
用的固相萃取技术净化样品不理想、易受基质干扰,回收率低。免疫亲和柱(IAC)是一种基于抗原抗体
反应的新型层析柱,利用生物大分子具有对一类生物大分子特异识别和可逆结合的特性制作而成,具有
独特的选择专一性和良好的吸附净化性能。目前,尚未见以免疫亲和柱作为前处理净化手段检测河豚
毒素的相关报道,本实验基于液相色谱串联质谱的高灵敏性和精确性,利用免疫亲和柱的独特选择识别
}h},建立一种快速、简便、高效测定海洋生物中河豚毒素的分析方法。
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