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关键词：
硫酸氧化锆,核磁共振,异丁烷,重构化
发表时间：
2012-07-12 15:11:07
HPLC_MS_MS检测含蛋白质辐照食品中的邻酪氨酸
杨金铭 | -> | 1315| 0| 0.306665MB |邻酪氨酸,含蛋白质辐照食品,液相色谱－串联质谱
摘要: 应用液相色谱－ 串联质谱(HPLC － MS /MS) 技术建立了含蛋白质辐照食品中邻酪氨酸的检测方法。样品经胰蛋白酶于37 ℃水解过夜，正己烷去脂，乙酸锌沉淀蛋白净化后，HPLC － MS /MS 检测。方法的定量下限为0. 1 mg /kg，邻酪氨酸在0. 1、0. 5、1. 0 mg /kg 加标水平的回收率为80%～ 97%，相对标准偏差(RSD，n = 6)为6. 3%～ 12. 9%。在2. 0、5. 0、10 kGy 3 个辐照剂量水平下，鸡肉、猪肉、牛肉、鱼肉和虾肉中的邻酪氨酸含量为0. 095 ～ 0. 677 mg /kg，邻酪氨酸含量与辐照剂量呈线性相关，相关系数( r) 大于0. 98。该方法灵敏、实用性强。
食品辐照技术是采用辐射源产生的γ 射线以及加速器产生的高能电子束(EB)辐照农产品和食品，利用电离辐射在食品中产生的辐射化学和辐射生物学效益，达到抑制发芽、推迟成熟、杀虫杀菌和改进品质等目的的新型食品保鲜加工技术［1 － 2］。我国卫生部于1984 ～ 1994 年先后颁布了马铃薯、大蒜、大米、蘑菇、苹果、香肠、猪肉、熟肉制品等18 种辐照食品的卫生标准。1996 和1997 年又分别颁布了“辐照食品卫生管理办法”和“辐照食品类别卫生标准”。近20 年来，我国食品辐照保藏技术应用的商业化进程较快，但检测方法却较滞后［3 － 5］。尽管食品辐照技术在国际上逐渐被认可，但美国、加拿大、欧盟等发达国家陆续出台法规，要求辐照食品标识国际食品辐照标志，以给予消费者知情权。我国出口食品中曾发生辐照食品未进行辐照标识而被退货的事件，因此我国急需建立针对不同辐照食品的检测方法。
含苯丙氨酸的蛋白质食品经辐照产生羟基化产物———邻酪氨酸和间酪氨酸，其中邻酪氨酸的含量最大，这些产物的存在是食品已被辐照的标志［4］。通过检测辐解产物邻酪氨酸含量判断蛋白质食品是否经过辐照，国外已有相关研究［6 － 8］，但国内尚未见相关报道。本课题组曾应用柱前衍生/高效液相色谱(HPLC)对邻酪氨酸含量进行了检测［9］。本研究采用胰蛋白酶水解辐照样品，代替传统的酸水解蛋白的方式，减少了基质干扰，并采用HPLC － MS /MS 技术对邻酪氨酸含量进行检测，较之HPLC 法，方法的灵敏度明显提高。
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