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关键词：
微生物,葡萄酒活性干酵母,发酵性能
发表时间：
2013-01-21 09:55:04
硼亲和色谱是以取代硼酸为配基的亲和色谱模式，主要用于顺式二羟基化合物的分离和富集。顺式二羟基化合物包括糖蛋白、糖肽、糖、核苷、核苷酸、核糖核酸( RNA) 等重要生物分子。随着蛋白质组学、代谢组学和糖组学等组学研究的兴起与发展，硼亲和色谱，尤其是基于纳米材料和整体材料的硼亲和分离介质，近年来受到越来越多的重视。南京大学刘震研究组系统地研究了硼亲和色谱及相关方法，发展出一系列硼亲和磁性纳米材料( J Chromatogr A，2009，1216: 7558 ～ 7563; Anal BioanalChem ，2011，399: 3423 ～ 3429; Chem Commun ，2011，47: 2255～ 2257) 和一系列硼亲和整体毛细管柱( J Chromatogr A，2009，1216:4768 ～ 4774; Angew Chem Int Ed，2009，48: 6704 ～ 6707; J ChromatogrA，2009，1216: 8421 ～ 8425) ，以及硼亲和固相微萃取( Talanta，2009，79: 746 ～ 751; Talanta，2010，82: 270 ～ 276) 和基于硼亲和相互作用的毛细管电泳在线样品浓缩方法( Talanta，2009，80: 544 ～ 550) 。
前不久，该研究组报道了一种独特的硼亲和整体毛细管柱( ChemCommun ，2011，47: 5067 ～ 5069) 。该整体毛细管柱以4-( 3-丁烯基砜基) 苯硼酸( BSPBA) 为功能单体，以N，N'-亚甲基双丙烯酰胺( MBAA)为交联剂，通过原位自由基聚合法合成。砜基的存在使得BSPBA 配基在中性pH 条件下对顺式二羟基化合物具有强的亲和力。亲水性功能单体和交联剂的使用使得该整体柱具有非常高的亲水性。由于不存在疏水性相互作用，该整体柱展现了对糖蛋白良好的专一性。该整体柱的独特性在于: 在酸性条件下洗脱时，通过硼亲和色谱保留的顺式二羟基化合物根据其氢键相互作用能力的大小得到一定程度的分离; 而其他硼亲和整体柱则不具有这种额外的分离能力。因此使用该整体柱可以在单一色谱柱上实现二维分离。
最近，该研究组报道了又一种新型的硼亲和整体毛细管柱( ChemCommun ，2011，DOI: 10. 1039 /c1cc11096a ) 。该整体柱在基柱的基础上通过后修饰合成: 首先通过原位自由基聚合法合成含有环氧基的整体毛细管，然后用含有活性氨基的Wulff 型苯硼酸频那醇酯对环氧基开环，得到的整体柱经酸处理、除去频那醇后用中等酸性或中性水溶液活化即得到最终的整体柱。Wulff 型苯硼酸对于硼亲和色谱具有重要意义，它具有非常低的酸解离常数( pK a = 5. 2) ，可以在中等酸性条件下与顺式二羟基化合物有强的硼亲和相互作用。但具有活性反应基的Wulff 型苯硼酸在合成时需要多步反应，而且存在纯化上的困难，目前没有商品化产品。该整体柱所用的Wulff 型苯硼酸频那醇酯为自制，利用后修饰和酸解的技术路线从而避开了纯化上的困难。该整体柱的出现具有重要意义，因为它将硼亲和色谱的适用pH范围从中性降低到了中等酸性( pH 5. 5) ，使得尿液、眼泪和唾液等pH 可能为酸性的生理样品可以不经过pH 调节直接进行硼亲和色谱富集和分离。
前不久，该研究组报道了一种独特的硼亲和整体毛细管柱( ChemCommun ，2011，47: 5067 ～ 5069) 。该整体毛细管柱以4-( 3-丁烯基砜基) 苯硼酸( BSPBA) 为功能单体，以N，N'-亚甲基双丙烯酰胺( MBAA)为交联剂，通过原位自由基聚合法合成。砜基的存在使得BSPBA 配基在中性pH 条件下对顺式二羟基化合物具有强的亲和力。亲水性功能单体和交联剂的使用使得该整体柱具有非常高的亲水性。由于不存在疏水性相互作用，该整体柱展现了对糖蛋白良好的专一性。该整体柱的独特性在于: 在酸性条件下洗脱时，通过硼亲和色谱保留的顺式二羟基化合物根据其氢键相互作用能力的大小得到一定程度的分离; 而其他硼亲和整体柱则不具有这种额外的分离能力。因此使用该整体柱可以在单一色谱柱上实现二维分离。
最近，该研究组报道了又一种新型的硼亲和整体毛细管柱( ChemCommun ，2011，DOI: 10. 1039 /c1cc11096a ) 。该整体柱在基柱的基础上通过后修饰合成: 首先通过原位自由基聚合法合成含有环氧基的整体毛细管，然后用含有活性氨基的Wulff 型苯硼酸频那醇酯对环氧基开环，得到的整体柱经酸处理、除去频那醇后用中等酸性或中性水溶液活化即得到最终的整体柱。Wulff 型苯硼酸对于硼亲和色谱具有重要意义，它具有非常低的酸解离常数( pK a = 5. 2) ，可以在中等酸性条件下与顺式二羟基化合物有强的硼亲和相互作用。但具有活性反应基的Wulff 型苯硼酸在合成时需要多步反应，而且存在纯化上的困难，目前没有商品化产品。该整体柱所用的Wulff 型苯硼酸频那醇酯为自制，利用后修饰和酸解的技术路线从而避开了纯化上的困难。该整体柱的出现具有重要意义，因为它将硼亲和色谱的适用pH范围从中性降低到了中等酸性( pH 5. 5) ，使得尿液、眼泪和唾液等pH 可能为酸性的生理样品可以不经过pH 调节直接进行硼亲和色谱富集和分离。
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