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关键词：
山杏,杏仁,影响,血脂,生物学,效应,研究,
发表时间：
2010-12-20 14:20:03
直接竞争EL I SA法快速检测动物源性食品中磺胺嘧啶残留
中国兽药 | -> | 4040| 0| 0.172339MB |直接,竞争,快速,动物,食品,磺胺,嘧啶,残留,
[摘 要] 采用重氮化- 偶联法将磺胺嘧啶( SD)与人血清白蛋白(HSA)相连制备了免疫抗原SD - HSA,与卵清白蛋白(OVA)相连制备了包被抗原SD - OVA,用过碘酸钠法将SD - OVA与辣根过氧化物酶(HRP)连接制备了酶标抗原( SD - OVA - HRP) 。用SD - HSA免疫BALB / c小鼠,经融合、筛选和克隆化制备了单克隆抗体,利用单抗建立了直接竞争EL ISA方法。该方法具有好的特异性,在1～729 ng/mL浓度范围标准曲线方程y = 12. 05x + 2. 253 8, R2 = 0. 995, IC50为41. 7ng/mL,在猪肉、鸡肉、鸡肝、鸡蛋、牛奶中的检测限分别为20、20、20、5、5 μg/kg。在20μg/kg和100μg/kg水平猪肉、鸡肉、鸡肝、牛奶、鸡蛋样品中添加,回收率为82. 78% ～104. 6%。与高效液相色谱方法比较,二者的阳性符合率为81. 3% ,阴性符合率为83. 3% ,总符合率为88. 9%;与同类英国RANDOX试剂盒比较,二者符合率为100%。
磺胺类药物是人工合成的一类具有对氨基苯磺酰胺共同母核结构的广谱抗菌药物,被广泛用于
畜牧业生产中。但该类药物具有诸多副作用[ 1 ] ,它可在动物体内残留,并通过动物源性食品借食物链以低剂量传递,直接威胁到人类身体健康。因此,我国和欧盟规定动物源性食品中总磺胺的最高残留限量(MRL)为100μg/kg[ 2 - 3 ] 。
目前常用的检测方法主要是高压液相色谱(HPLC)法[ 4 - 5 ] 。该方法灵敏、准确,但其耗时,费力,成本高,需要昂贵的设备,需要专业人员操作,推广使用受到一定限制。酶联免疫吸附法
(EL ISA)是一种快速、灵敏、特异和安全的检测小分子药物残留的方法,其规模化筛选特点更适应于常规化检测的需要。
本研究利用抗磺胺嘧啶单克隆抗体包被酶标板,根据酶标抗原与磺胺嘧啶竞争结合单抗的原理
建立了直接竞争EL ISA方法,该方法能够用于多种动物源性食品中磺胺嘧啶残留的检测。
畜牧业生产中。但该类药物具有诸多副作用[ 1 ] ,它可在动物体内残留,并通过动物源性食品借食物链以低剂量传递,直接威胁到人类身体健康。因此,我国和欧盟规定动物源性食品中总磺胺的最高残留限量(MRL)为100μg/kg[ 2 - 3 ] 。
目前常用的检测方法主要是高压液相色谱(HPLC)法[ 4 - 5 ] 。该方法灵敏、准确,但其耗时,费力,成本高,需要昂贵的设备,需要专业人员操作,推广使用受到一定限制。酶联免疫吸附法
(EL ISA)是一种快速、灵敏、特异和安全的检测小分子药物残留的方法,其规模化筛选特点更适应于常规化检测的需要。
本研究利用抗磺胺嘧啶单克隆抗体包被酶标板,根据酶标抗原与磺胺嘧啶竞争结合单抗的原理
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