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关键词：
聚合离子液体;石墨烯;固相萃取;有机磷农药
发表时间：
2017-02-07 11:47:20
酶切型稳定同位素标记肽段为内标用于药物代谢酶的绝对定量分析_刘喜东
宋丹杨 | -> | 470| 0| 0.825678MB |稳定同位素标记肤段;绝对定量;酶切位点;药物代谢酶
随着蛋白质组学研究的不断深入，以及研究技术的不断创新和发展，定量蛋白质组学研究正逐渐成
为该领域方法学研究的热点，使得蛋白质组学的研究内容更加直观和具体[D - 37。鉴于蛋白质分子量较
大、结构复杂、种类较多、同源性较高、不易纯化等特点，研究人员多采用生物质谱技术和稳定同位素标
记联用技术进行蛋白质的相对定量和绝对定量研究。目前，主要的定量蛋白质组学方法有稳定同位素
代谢标记法(Stable isotope labeling with amino acid in cell culture SILAC) }4'S}、稳定同位素标签标记法
(如Isotope coded affinity tags } ICAT ; Isobaric tags for relative and absolute quantification } iTRAQ) t}}、以及
稳定同位素标记的氨基酸、肤段、蛋白质和肤段串联体(Concatamers of Q peptides } QconCAT) }''8}作为内
标的蛋白质定量方法。
药物代谢酶是催化药物在体内代谢的一类蛋白酶，影响药物在体内的有效性和安全性，在药物开发
过程中受到广泛关注[C9, i of。近年来，己有文献基于定量蛋白质组学的方法对药物代谢酶进行定量研
究[D‘一‘5]，但是考虑到样品的处理过程对测定结果的影响，不同方法都有各自的缺陷。为了尽量降低样
品的处理过程对测定结果的影响，本实验设计带有酶切位点的稳定同位素标记肤段作为内标，使内标肤
段和肝微粒体样本经过共同的样品处理过程，使得测定结果更准确可靠。实验中同时对经过不同样品
处理过程所得测定结果进行对比分析，探讨样品处理过程对测定结果的影响，提出适用于药物代谢酶及
其它蛋白质定量的合理方案。
为该领域方法学研究的热点，使得蛋白质组学的研究内容更加直观和具体[D - 37。鉴于蛋白质分子量较
大、结构复杂、种类较多、同源性较高、不易纯化等特点，研究人员多采用生物质谱技术和稳定同位素标
记联用技术进行蛋白质的相对定量和绝对定量研究。目前，主要的定量蛋白质组学方法有稳定同位素
代谢标记法(Stable isotope labeling with amino acid in cell culture SILAC) }4'S}、稳定同位素标签标记法
(如Isotope coded affinity tags } ICAT ; Isobaric tags for relative and absolute quantification } iTRAQ) t}}、以及
稳定同位素标记的氨基酸、肤段、蛋白质和肤段串联体(Concatamers of Q peptides } QconCAT) }''8}作为内
标的蛋白质定量方法。
药物代谢酶是催化药物在体内代谢的一类蛋白酶，影响药物在体内的有效性和安全性，在药物开发
过程中受到广泛关注[C9, i of。近年来，己有文献基于定量蛋白质组学的方法对药物代谢酶进行定量研
究[D‘一‘5]，但是考虑到样品的处理过程对测定结果的影响，不同方法都有各自的缺陷。为了尽量降低样
品的处理过程对测定结果的影响，本实验设计带有酶切位点的稳定同位素标记肤段作为内标，使内标肤
段和肝微粒体样本经过共同的样品处理过程，使得测定结果更准确可靠。实验中同时对经过不同样品
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