毛细管电泳在线聚焦原理_技术及应用

崔永源 | -> | 1143| 7| 0.567997MB |毛细管电泳,在线聚焦,预浓缩,堆积,综述

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摘要:毛细管电泳以其分析速度快、分离效率高、操作简便、能够实现高通量而获得了广泛的应用,但由于检测窗口小而导致其检测灵敏度低。为了提高检测灵敏度,目前已发展了多种毛细管电泳在线聚焦和样品预浓缩技术,如场放大样品堆积、pH调节浓缩、胶束电动毛细管色谱、等速电泳等。这些技术由于能够在毛细管内同时实现样品的聚焦和分离、操作简便而获得了广泛的兴趣和关注。本文针对毛细管电泳的在线聚焦的原理、技术和应用做一简要的介绍和总结。
     毛细管电泳(capillary electrophoresis,CE)是20世纪80年代发展起来的一项分离技术,它以高压电场为驱动力,以弹性石英熔融毛细管或微流孔道为微分离通道,实现分析物的定性、定量分析。因其分析速度快、分离效率高、操作简便,具有高通量分析的潜力,而应用范围十分广泛,它可以实现从无机离子[1-3]、小分子[4]、氨基酸和多肽[5]、手性物质[6,7]到生物大分子如蛋白质[8]、脱氧核糖核酸(DNA)[9],甚至单细胞水平[10,11]的分析,在食品[12]、药物[7,13-15]、法医[16]、环境[17-19]、生命科学[20]等领域获得了极为广泛的应用。
  但由于毛细管内径一般为20~100μm,且检测光程短,相应的检测体积一般在nL级,只有液相色谱的检测池(μL级)的1/100,因此在最常用的紫外检测器(UV)中,检出限只能达到10-5 mol/L级。
  针对其检测灵敏度低的问题,目前主要有3种解决方法:一是采用Z形池(Z-type cell)或泡状池(bubble cell)等增加检测窗口的宽度;二是采用高灵敏的激光诱导荧光检测器(LIF)用于毛细管中样品的检测;三是对样品进行预处理或预浓缩(preconcentration),然后对分析物进行电泳分离分析。其中,样品前处理技术主要包括固相萃取(SPE)和液-液萃取(LLE)等,这在分析生物或环境等复杂组成的样品中起着重要的作用。而毛细管电泳在线预浓缩技术由于易于调控,可同时实现样品的堆积与分离,操作相对简便,能够显著提高检测灵敏度,而受到大家的青睐。
  目前常用的样品在线预浓缩[21-24]或堆积技术主要包括以下几类:场强放大样品堆积(field-amplified sample stacking,FASS)技术,pH 调节聚焦[25-27],基于胶束电动毛细管色谱(micellar electrokinetic capillary chromatography,MEKC)的堆积(stacking)技术[28,29]和吹扫(sweeping)技术[28,30,31],等速电泳(isotachophoresis,ITP)聚焦[32]等。本文将对这些毛细管在线聚焦的原理、技术和应用及其最新进展做简要介绍。
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