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关键词：
TCA,固相微萃取,软木塞,葡萄酒
发表时间：
2012-09-26 08:36:18
原生质体复合诱变选育耐高温高产乙醇酵母菌株
王文卿 | -> | 690| 0| 0.539974MB |燃料乙醇,酿酒酵母,原生质体,紫外线,亚硝基胍,复合诱变
摘要： 以酿酒酵母Ygx-5 为出发菌株，对其原生质体进行紫外线（UV）与亚硝基胍（NTG）复合诱变，经初筛和复筛，选育出1 株耐高温、高产乙醇菌株U-N2。在37℃培养条件下，菌株U-N2 产乙醇浓度最高可达16.32 %vol，比原菌株提高20.44 %，比只用紫外线诱变后的菌株提高8.04 %，比只用亚硝基胍诱变后的菌株提高6.27 %。经过20 次传代培养，乙醇产量稳定。
能源危机、环境危机日益加重，使得开发燃料乙醇作为汽油替代品已成为世界各国的共识。酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）是目前使用最广泛的菌种之一，具有生长旺盛、生物量大、公认安全等优良特点。传统的酿酒酵母的乙醇发酵最适温度为28～33 ℃， 一般不超过
35 ℃，这一限制因素增加了乙醇的生产成本，甚至在部分气温较高地区根本无法进行正常生产[1]。使用耐高温酵母不仅有利于降低生产水耗、电耗， 充分利用现有设备，缩短生产周期，提高生产率，而且保证了夏季的正常生产。因此，选育在高温条件下有高抗逆性、产乙醇能力强的菌种就成为实现乙醇浓醪发酵的关键之一。
紫外线是一种最常用的物理诱变因素， 而亚硝基胍（NTG）是一种化学超级诱变剂，有很强的诱变作用。将两种诱变方法结合， 有效避免使用单一诱变剂产生的饱和效应，可使诱变效果远远大于独立诱变[2]。与菌体相比，原生质体由于去除了细胞壁，对诱变剂更加敏感, 有可能更容易得到优良的突变株[3]。因此，通过对实验室筛选得到的1 株高产乙醇酵母为出发菌株， 经过紫外线与亚硝基胍复合诱变选育出在高温条件下高产乙醇的酵母突变菌株。
35 ℃，这一限制因素增加了乙醇的生产成本，甚至在部分气温较高地区根本无法进行正常生产[1]。使用耐高温酵母不仅有利于降低生产水耗、电耗， 充分利用现有设备，缩短生产周期，提高生产率，而且保证了夏季的正常生产。因此，选育在高温条件下有高抗逆性、产乙醇能力强的菌种就成为实现乙醇浓醪发酵的关键之一。
紫外线是一种最常用的物理诱变因素， 而亚硝基胍（NTG）是一种化学超级诱变剂，有很强的诱变作用。将两种诱变方法结合， 有效避免使用单一诱变剂产生的饱和效应，可使诱变效果远远大于独立诱变[2]。与菌体相比，原生质体由于去除了细胞壁，对诱变剂更加敏感, 有可能更容易得到优良的突变株[3]。因此，通过对实验室筛选得到的1 株高产乙醇酵母为出发菌株， 经过紫外线与亚硝基胍复合诱变选育出在高温条件下高产乙醇的酵母突变菌株。
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