磺胺类药物单链抗体的制备及其与磺胺噻唑相互作用研究

杨艳 | -> | 424| 0| 1.56977MB |同源建模;分子对接;单链抗体;磺胺噻唑

杨艳 杨艳 | 文档量 |浏览量14265

    磺胺类药物(Sulfonamides } SAs)是目前应用范围最广、用量最大、种类最多的抗菌药物之一,其不
合理使用在食品和环境中造成的残留给人类健康带来潜在危害。基于抗原巾i.体特异性反应的免疫分
析具有灵敏度高、操作简便、成本低且适合现场快速检测而越来越受到重视。磺胺类药物多特异性抗体
已有很多报道Ci -z7,这些抗体识别磺胺类药物的种类存在显著差异,难以应用于磺胺类药物的多残留检
测。研究磺胺类药物与抗体之间的识别机制,探讨影响抗体识别的关键因素,对磺胺类药物半抗原设计
的进行改进从而制备出性能更加优良的抗体具有重要的理论意义和应用价值。
    单链抗体(Single chain variable fragment } seFv)是抗体分子中保留抗原结合部位的最小功能片段,
以seFv为研究对象,通过同源建模、分子对接和构效关系等方法来研究抗原由t体之间的相互作用,可
为了解抗体识别机制提供必要的结构信息〕一67。fang等构建了河豚毒素的、eFv,并通过同源建模和分
子对接研究了seFv和河豚毒素的相互作用,预测相互作用的两个必需氨基酸为K183和I189,通过定点
突变验证了该预测的可靠性团0。等利用基因工程技术将抗黄体酮seF、中的关键氨基酸X100定点
突变成其它15种氨基酸,发现突变体与野生型seFv的特异性和亲和力存在明显差异,其中,将X100突
变成8100后显著提高了抗体对孕酮衍生物(Progesterone 3}M0)的亲和力Cs7,证明可通过基因工程技
术改变结合位点的关键氨基酸来改变抗体的识别能力,并可能获得亲和力更高的抗体。
    本研究通过制备磺胺类药物单克隆抗体4C7对应的seFv,利用同源建模和分子对接,通过实验研
究和理论分析对磺胺曝挫与4C7的相互作用进行了初步研究,为全面了解4C7的识别机制、制备识别
谱更广的磺胺类药物抗体奠定了基础。
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